Токсико-гигиенические свойства биомосов,
свидетельствующие об их безвредности
Токсическую характеристику биомосов изучали на белых мышах (беспородных и линии СБА), белых крысах популяции Вистар (сублинии неинбредной разводки), морских свинках породы "белобокие", кроликах породы Шиншилла, собаках и сельскохозяйственных животных, которые находились в хозяйстве под наблюдением ветеринарных специалистов.
Параметры острой токсичности определяли на крысах и мышах обоего пола, при оральном, парентеральном (внутрибрюшинном), внутривенном и ингаляционном путях введения испытуемых препаратов. Длительность наблюдения после однократного введения составляла 21 день.
При оральном применении среднесмертельную дозу (ЛД50; доза, вызывающая гибель 50% животных) рассчитать не удалось, поскольку для всех исследованных в этом аспекте биомосов (фодомос, биомос-ВЖ, биомос-Ч, биомос-Т и некоторые другие, полученные из различного растительного сырья) она оказалась выше уровня 10 г/кг массы тела для крыс и 15 г/кг для мышей - максимально возможных для такого введения доз препаратов. При внутрибрюшинном введении растворов фодомоса, биомоса-Ч, биомоса-Т ЛД50 для мышей и крыс находилась в пределах 0,96 - 1,78 г/кг массы тела; ЛД50 биомоса-ВЖ составляла 0,21 - 1,41 г/кг массы тела (самки мышей были почти в три раза более устойчивы, чем самцы, но мыши в целом оказались менее устойчивы, чем крысы).
При внутривенном введении биомоса кроликам установить ЛД50 тоже не удалось, так как гибель животных не наступала даже от максимально возможной дозы для внутривенного введения - 0,2 г/кг массы тела.
Двухчасовая ингаляционная статическая затравка нативными биомосами (при нормальном атмосферном давлении) не привела к изменению внешнего вида и поведения у подопытных животных по сравнению с контролем.
Приведенные данные свидетельствуют о том, что все биомосы относятся к практически нетоксичным веществам, V класс опасности; лишь биомос- ВЖ при внутрибрюшинном введении может быть отнесен к малотоксичным веществам, IV класс опасности.
При субхроническом эксперименте внутрижелудочное введение препаратов белым крысам в дозе 0,1 г/кг массы тела ежедневно в течение 30 дней не оказало заметного влияния ни на одну из исследованных функций организма: показатели крови, мочи, деятельности сердца, печени, почек и надпочечников по сравнению с таковыми в контрольных группах не изменились.
При аналогичном введении препаратов в дозе 1,0 г/кг массы крыс отмечались некоторые сдвиги показателей, притом, что значения средних величин не выходили за пределы физиологической нормы.
Гистологическое исследование паренхиматозных органов у выведенных из опыта животных не выявило патологических изменений в тканях, но некоторая вакуолизация клеток пучковой зоны коры надпочечников, полнокровие центральных вен печени, сосудов и незначительное расширение просветов извитых канальцев в почках свидетельствовали о высоком функциональном напряжении этих органов (по сравнению с состоянием их у животных контрольных групп).
Следовательно, даже в высокой дозе -1,0 г/кг массы тела - биомосы не оказывали токсического действия, а имевшие место изменения носили транзиторный и функциональный характер.
Кумулятивные свойства биомосов (т.е. их способность накапливаться в организме) изучали в специальных экспериментах. При ежедневном 25-кратном внутрижелудочном введении 0,1 - 1,22 части ЛД50 препарата, установленной при внутрибрюшинном вливании, с помощью пробит-анализа рассчитывали коэффициент кумуляции и степень кумулятивного действия. Коэффициент кумуляции составил 9,5, что свидетельствует об отсутствии у препарата выраженных кумулятивных свойств. Этот вывод подтверждается и данными экспериментов, в которых изучалась фармакокинетика биомосов.
Хроническое введение фодомоса (ежедневно в течение 6 месяцев) в дозе 0,1 г/кг массы тела не вызвало значимых изменений функциональных показателей у крыс Вистар и у морских свинок.
Хроническое введение биомосов кроликам и собакам в дозах 0,1 и 0,2 г/кг массы не оказало заметного влияния на показатели углеводного обмена у этих животных.
При шестимесячном введении биомоса белым крысам, морским свинкам и кроликам тиреоидная функция щитовидной железы и тиреотропная функция гипофиза этих животных не претерпели значимых изменений по сравнению с показателями контрольных групп животных.
Не обнаружено и изменений функции коры надпочечников у белых крыс и морских свинок при хроническом введении им биомоса, о чем судили по количеству 11-оксикортикостероидов в крови, 17-оксикортикостероидов и 17-кетостеоидов в моче - эти показатели в подопытных группах значимо не отличались от таковых в контроле.
Изучение местного повреждающего действия биомоса, проведенное на морских свинках, не выявило раздражающего, повреждающего кожу и сенсибилизирующего эффекта препарата при нанесении его на участок кожи (5 х 5 см) в количестве 20 мг/см2 при экспозиции 4 часа.
Влияние биомосов на слизистые оболочки изучено при субконъюктивальной инстиляции препаратов кроликам, однократно, в дозе 50 мг.Только вливание биомоса-ВЖ вызвало спустя час покраснение век, исчезнувшее через сутки. Другие биомосы никакого повреждающего действия не оказывали.
При изучении возможного кожно-резорбтивного действия использовали "пробирочный" метод. Хвосты белых мышей помещали в 50% водный раствор препарата по общепринятой схеме. Однократное воздействие биомоса по этой схеме не вызывало гибели животных и видимых клинических симптомов интоксикации. Перкутанное поступление препарата в организм в опыте (15 суток) также не сопровождалось симптомами его общетоксического действия.
Изучение токсикодинамики биомоса-ВЖ в специальных опытах показало, что в дозах 0,1 и 0,01 г/кг массы тела ежедневно в течение 7 суток он не вызывает поражения и нарушения функций почек.
Для изучения фармакокинетики биомосов их метили по Р32 и в водном растворе вводили внутрижелудочно крысам Вистар и цыплятам-бройлерам с массой тела 50-60г (пяти-шестидневным) в дозе 0,1 г/кг массы. Контрольные крысы и цыплята получали в той же дозе раствор меченого натрия фосфорнокислого (Na2HP32O4·12H2O). Радиоактивность растворов меченых препаратов составляла 50 мкк в 0,1 мл.
Крыс (по 5 животных в каждой группе) забивали через 24,72 и 96 часов после введения меченых препаратов. Проводили радиометрию внутренних органов, фекальных масс и бедренной мышцы.
Через 24 часа после введения меченых растворов наибольшая активность определялась в печени и фекальных массах, наименьшая - в мышечной ткани, что свидетельствует о преимущественном выведении биомосов через желудочно-кишечный тракт. Через 72 часа радиоактивность внутренних органов достоверно снижалась, причем биомосы способствовали выведению радиоактивной метки в более ранние сроки , чем в контроле. Через 96 часов после введения препараты практически полностью выводились из организма.
У цыплят радиометрию проводили в течение трех суток - через 24,48 и 72 часа, учитывая более высокую интенсивность обмена у птицы. Через 24 часа повышенная радиоактивность обнаружилась во всех органах и тканях как подопытной, так и контрольной птицы, что свидетельствовало об интенсивном поглощении препарата и сорбции его из желудочно-кишечного тракта. Через 48 часов радиоактивность достоверно снизилась во всех тканях. Через трое суток в тканях выявлены лишь следы остаточной радиоактивности у подопытной птицы, получавшей биомосы. У контрольных цыплят в печени была обнаружена остаточная радиоактивность.
В целом можно заключить, что биомосы выводятся из организма в основном через желудочно-кишечный тракт в течение двух-трех дней после введения.
Тератогенное и эмбриотоксическое действие биомосов изучали на белых крысах по рекомендованным методикам. Беременным крысам вводили биомосы в дозе 1,2 г/кг массы тела: в одних группах - с 1 по 13 день беременности, в других - с 14 по 21 день (доимплантационный и постимплантационный периоды). На 21 день животных забивали и эмбрионы подвергали патоморфологическому исследованию, сравнивая их с соответствующими эмбрионами контрольной группы. Об эмбриотоксическом действии судили на основании подсчета количества желтых тел в яичниках, гибели плодов, внешних аномалий развития эмбрионов, числа живых и мертвых эмбрионов. Тератогенность оценивали по данным макро- и микроскопического анализа эмбрионов и их внутренних органов, в том числе по нарушению развития и расположения костей осевого скелета и черепа.
У 25% беременных интактных самок, забитых на 21 день беременности, отмечена спонтанная патология беременности. У крыс, получавших биомосы в дозе, превышающей терапевтическую в 10 - 120 раз, статистически значимых отклонений в прохождении беременности ни в один из сроков наблюдения не обнаружено. При визуальном осмотре внешнего вида плодов и микроскопическом исследовании эмбрионов никаких аномалий развития в подопытных группах не выявлено.
Мутагенную активность биомосов изучали с помощью метода "Меллер-6", в основу которого положен анализ Х-хромосом самцов мух Drosophila melanogaster при скрещивании их с мухами-самцами Меллер-6. В питательную среду вводили биомосы в восьми концентрациях - от 0,005% до 2,5%. Выживаемость мух при всех изученных концентрациях была не ниже, чем в контроле. Во втором поколении во всех восьми группах соотношение самцов и самок составляло 1:1 и самцы имели нормальный фенотип, что свидетельствует об отсутствии мутагенного эффекта.
Канцерогенный эффект фодомоса и биомоса-ВЖ изучали на белых крысах обоего пола. В подопытные и контрольную группы входило по 25 самцов и самок. Биомосы вводили внутрижелудочно в дозе 0,1 г/кг массы тела 2 раза в неделю на протяжении года. Наблюдения продолжали вплоть до естественной гибели животных. Раз в неделю крыс осматривали и взвешивали. Внутренние органы павших животных подвергали патомофологическому анализу.
Длительность жизни получивших биомосы крыс значимо превышала таковую животных контрольной группы (499±26 и 422±38, соответственно Р<0.01).
Причиной гибели животных служили воспалительные процессы и ухудшение усвоения корма. Клинических признаков токсикоза, а также наличия опухолей (за исключением одного случая фибромы) у животных, получавших биомосы, не обнаружено.
Биомос-ВЖ не проявил стимулирующего действия на развитие спонтанного лейкоза у мышей и даже способствовал при многократном пероральном введении продлению жизни у высоколейкозных мышей линии AKR: продолжительность жизни у мышей подопытной группы - 150,5±17,5 дня, а в контрольной - 106,7 ±10,6 дня; Р<0,05.
Исследования эффекта передозировки биомосов проводили на собаках, кроликах и телятах. Собакам фодомос вводили однократно внутрижелудочно в дозах 1,2,3 и 4 г/кг массы тела животного. Действие препарата оценивали по общей реакции собаки на окружающую обстановку и зов экспериментатора, тактильной и болевой чувствительности, зрачковой реакции и положению животного в станке, а также по функции желудочно-кишечного тракта, содержанию сахара в крови, уровню неэстерифицированных жирных кислот в крови (НЭЖК), показателям ЭКГ и температуры тела.
Первые три дозы (1,2,3 г/кг массы тела) заметных изменений по сравнению с состоянием животных до начала опыта не вызвали. При дозе в 4 г/кг, которую оказалось возможным ввести лишь через павловскую фистулу непосредственно в желудок в виде 50% водной пасты, отмечены значимые изменения только в показателях ЭКГ: через час после введения у всех пяти собак наблюдалось уменьшение частоты сердечных сокращений, у одной - выраженная ишемия миокарда, у двух - увеличение вольтажа зубцов. Через 2 часа признаки ишемии были менее выражены, но увеличение вольтажа зубцов и снижение частоты сердечных сокращений сохранялись. Введение платифилина (1 - 1,5 мл) через 40 мин привело к улучшению ЭКГ у трех животных, а через сутки она не отличалась от исходной у всех пяти собак.
Кролики получали однократно внутрижелудочно максимально возможную для введения таким способом дозу - 2 г/кг массы тела, что превышало терапевтическую дозу в 2000 раз. Показатели ЭКГ и энцефалограммы через 1,2,3,4,6,8 и 12 часов после введения биомоса не отличались от таковых в контрольной группе.
Трем новорожденным телятам, заболевшим неинфекционной диспепсией, ежедневно двукратно вводили по 3,0 г биомоса-ВЖ, что в 10-12 раз превышало терапевтическую дозу. Четыре теленка с таким же заболеванием служили контролем. По окончании опыта (через 10 дней) телят забили и провели патологоанатомический и гистоморфологический анализ внутренних органов. При этом установлен явный лечебно-профилактический эффект биомоса при отсутствии каких-либо признаков эффекта передозировки.
Все вышесказанное позволяет заключить, что биомосы являются практически безвредными веществами, не вызывающими изменений в организме животных даже при применении их в максимально возможных дозах.
.......................................................................................
Copyright© 2002г. АО"Биомос"
Web-master